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Thermo Scientific Orbitrap Fusion 是賽默飛zui高端的四極桿-靜電場(chǎng)軌道阱-線(xiàn)性離子阱三合一組合式質(zhì)譜。Fusion使用的Orbitrap為超高場(chǎng)Orbitrap質(zhì)量分析器，相比于賽默飛其他Orbitrap系列產(chǎn)品，Fusion具有超高分辨、高靈敏度、多級質(zhì)譜能力，并且配備多種裂解模式（CID、HCD及可升級的ETD），非常適合蛋白質(zhì)組學(xué)中復雜體系的高通量蛋白檢測。

Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhì)譜儀是行業(yè)領(lǐng)先的高性能質(zhì)譜儀，靈敏度更強。包含三個(gè)質(zhì)量分析器，四極桿、Orbitrap和線(xiàn)性離子阱（LIT）?？捎糜诘鞍踪|(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)和生物制藥領(lǐng)域。

Thermo Orbitrap Fusion三合一高分辨質(zhì)譜儀的結構

經(jīng)液相色譜（LC）柱分離后，化合物通過(guò)樣品傳輸線(xiàn)進(jìn)入質(zhì)譜儀（MS）進(jìn)行電離和分析。MS可以通過(guò)執行MSn實(shí)驗來(lái)提供有關(guān)化合物的質(zhì)荷比（m/z）的信息以及結構和定量信息。Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhì)譜儀的基本結構包括離子源、離子光學(xué)器件、質(zhì)量分析儀和檢測器。

離子源

連接到LC的離子源是大氣壓電離（API）。API源用作LC和MS之間的接口，包括以下電離技術(shù)：加熱電噴霧電離（H-ESI），大氣壓化學(xué)電離（APCI）和大氣壓光電離（APPI）。除了API離子源外，在電動(dòng)離子漏斗后面的API離子源界面中還有第二個(gè)離子源（RIS）。

離子光學(xué)器件

離子光學(xué)器件將氣相樣品離子聚焦并加速進(jìn)入質(zhì)量分析儀。它包括MP00離子光學(xué)器件、MP0離子光學(xué)器件、MP1離子光學(xué)器件、彎曲線(xiàn)性阱（C型阱）、離子路由多極（IRM）、MP3離子光學(xué)器件和DC偏移電壓。MP00離子光學(xué)器件包括MP00 RF透鏡和L0透鏡，位于A(yíng)PI源接口和MP0離子光學(xué)器件之間。MP0離子光學(xué)系統，也稱(chēng)為有源束波導（ABG），將來(lái)自MP00離子光學(xué)系統的離子沿中心軸通過(guò)90度弧線(xiàn)傳輸到四極。90度電弧可通過(guò)防止中性物質(zhì)和高速團簇進(jìn)入四極桿來(lái)降低噪音。MP1離子光學(xué)器件充當離子傳輸設備，通過(guò)MS向棒施加射頻（RF）電壓以產(chǎn)生電場(chǎng)，沿著(zhù)四極桿的軸引導離子，從而將離子從四極桿傳輸到C阱。進(jìn)入C阱后，離子通過(guò)與氮氣碰撞氣體碰撞而失去其動(dòng)能，并聚集在C阱的中心軸上。IRM包含一個(gè)安裝在金屬管內的多極直管，直接對準C阱。將電勢梯度施加到多極管以快速提取離子。MP3離子光學(xué)器件可以通過(guò)將射頻電壓施加到桿上的方式把離子從IRM傳輸到雙壓LIT，以產(chǎn)生沿多極軸引導離子的電場(chǎng)。

質(zhì)量分析儀

Thermo Orbitrap Fusion三合一高分辨質(zhì)譜儀包含三個(gè)質(zhì)量分析儀，四極桿、Orbitrap和LIT。

四極質(zhì)量分析儀（Q1）包含四個(gè)圓桿。MS向桿施加RF電壓和DC偏移電壓。當將可變幅度的RF和DC電壓施加到可以產(chǎn)生電場(chǎng)的四極桿時(shí)，電場(chǎng)可以使具有特定m/z的離子產(chǎn)生穩定的振蕩，而對所有其他離子產(chǎn)生不穩定的振蕩。即，Q1用作質(zhì)量過(guò)濾器，使選定的離子能夠通過(guò)桿。四極桿僅在施加RF電壓時(shí)用作離子傳輸設備。

軸對稱(chēng)的Orbitrap質(zhì)量分析儀包含一個(gè)紡錘狀的中心電極，該中心電極被一對鐘形的外部電極圍繞。運動(dòng)的離子可能被靜電場(chǎng)捕獲。離子在Orbitrap內部經(jīng)過(guò)靜電場(chǎng)，迫使它們以復雜的螺旋形運動(dòng)。這些振蕩的軸向分量可以通過(guò)電極的兩半檢測為鏡像電流。使用傅里葉變換將圖像電流轉換為質(zhì)譜圖。

LIT質(zhì)量分析器是雙單元二維LIT質(zhì)量分析器，由前轉移透鏡（TL1）、高壓LIT池、中心轉移透鏡（TL2）、低壓LIT池和后轉移鏡頭（TL3）組成。質(zhì)量分析器單元內部是精密加工和精確對齊的雙曲線(xiàn)桿的方形陣列，該桿具有前、中、后三個(gè)部分。

LIT質(zhì)量分析儀進(jìn)行的步驟包括離子存儲、離子隔離、碰撞誘導解離（CID）和離子掃描。對于SIM或MSn，LIT質(zhì)量分析儀將離子隔離波形電壓施加到X桿上，同時(shí)主AC電壓斜率上升到新的存儲電壓，噴射出除選定m/z離子以外的所有離子。另外，對于MSn，LIT質(zhì)量分析器將共振激發(fā)AC電壓施加到X桿上，以產(chǎn)生CID。為了掃描出離子，主RF電壓從低壓上升到高壓，同時(shí)MS向X桿施加共振噴射AC電壓以促進(jìn)噴射。隨著(zhù)主RF電壓的增加，m/z值增加的離子變得不穩定，并通過(guò)X桿中的槽噴出。

離子檢測系統

Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhì)譜儀具有高靈敏度和離軸離子檢測系統。該檢測系統包含兩個(gè)轉換打拿極和一個(gè)電子倍增器。它可產(chǎn)生高信噪比（S/N），與檢測到的離子數量成正比，并且可以在正負離子工作模式之間切換電壓極性。

Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhì)譜儀的掃描類(lèi)型

MS掃描：MS掃描（或全掃描MS）對應的是質(zhì)量分析的單個(gè)階段。在這種掃描類(lèi)型中，離子源中形成的離子存儲在IRM中，然后將離子轉移到Orbitrap或LIT質(zhì)量分析儀，以產(chǎn)生指定質(zhì)量范圍內可觀(guān)察離子的完整質(zhì)譜圖。MS掃描可用于定性和定量分析。此掃描類(lèi)型還可用于確定化合物的分子量和強度。

MS2掃描和MSn掃描：MS2掃描對應的是MS/MS質(zhì)量分析。在MS/MS掃描的第一階段，我們可以使用四極桿或離子阱來(lái)選擇離子。然后將選定的離子轉移到IRM中的高能碰撞解離（HCD）或CID、電子轉移解離（ETD）或UVPD的LIT中。在MS/MS掃描的第二階段，產(chǎn)物離子被轉移到軌道阱或LIT中進(jìn)行分析和檢測。在MSn掃描中，n的掃描功率通常為2到10，這意味著(zhù)它涉及2-10個(gè)質(zhì)量分析階段。每個(gè)階段都包含一個(gè)離子選擇步驟。掃描功率越高，可獲得的化合物結構信息越多。

SIM掃描：選擇性離子監測（SIM）是質(zhì)量分析的單個(gè)階段，可以監測特定離子或一組離子。在這種掃描類(lèi)型中，Orbitrap或LIT選擇并檢測m/z范圍內的離子，以產(chǎn)生SIM質(zhì)譜圖。

Thermo Orbitrap Fusion三合一高分辨質(zhì)譜儀的zui新技術(shù)

1. EASY-IC選擇。Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhì)譜儀還有一個(gè)離子源（RIS），位于電動(dòng)離子漏斗后面的API源接口中。此內部校準可將m/z分配精度提高到小于1 ppm。RIS生成內部校準離子，以正負兩種模式對MS掃描進(jìn)行實(shí)時(shí)質(zhì)量校準。

2. EASY-ETD選擇。ETD是一種通過(guò)將電子轉移到多個(gè)帶電荷的氣態(tài)分子上而使之分裂的解離方法。ETD和EThcD HD模式在Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhì)譜儀中用于增加ETD光譜的檢測限和動(dòng)態(tài)范圍。

3. 紫外線(xiàn)光解離（UVPD）選擇。具有UVPD的Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhì)譜儀提供了額外的獨特MSn功能。這種新穎的片段化模式具有三合一平臺的多功能性，可以對蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)的大分子和小分子進(jìn)行深入的結構分析。

4. 1,000,000 FWHM超高分辨率。具有MSn能力和多種碎片模式的超高分辨率可對多種分析物進(jìn)行全面表征。

Thermo Orbitrap Fusion三合一高分辨質(zhì)譜儀的應用

Thermo Orbitrap Fusion三合一高分辨質(zhì)譜儀具有出色的靈敏度、選擇性和多功能性，可幫助獲得最高質(zhì)量的數據。該質(zhì)譜儀配備有亮度最高的離子源、最具選擇性的四極桿、最快的離子阱分析儀，完善的解離技術(shù)和超高分辨率Orbitrap分析儀，適用于許多富有挑戰性的應用。

翻譯后修飾（PTM）分析

PTM在蛋白質(zhì)組學(xué)中起著(zhù)重要的作用，調節細胞活性定位，與其他細胞分子發(fā)生相互作用，如蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)和輔因子。Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhì)譜儀具有CID、HCD、ETD和EThcD等多個(gè)片段，可用于PTM分析，尤其是糖基化分析。例如，ETD和EThcD可以提供糖肽主鏈片段化的MS/MS譜圖，從而找到準確的修飾位點(diǎn)定位。

蛋白質(zhì)定量

質(zhì)譜在蛋白質(zhì)定量中起重要作用。使用同位素標簽的多重分析法被廣泛應用于蛋白質(zhì)豐度的高通量定量比較。Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhì)譜儀可以執行同量異位素標記TMT，能夠以高定量精度同時(shí)分析10個(gè)樣品。Orbitrap Fusion Lumos具有高選擇性和更高的靈敏度，可實(shí)現最佳性能，同時(shí)可保持對低豐度分析物定量的高重現性。

完整蛋白質(zhì)分析

自上而下的蛋白質(zhì)組學(xué)通常分析的是完整的蛋白質(zhì)，通過(guò)質(zhì)譜儀中完整蛋白質(zhì)的片段化，提供有關(guān)PTM、蛋白質(zhì)異構體和蛋白質(zhì)序列的信息。Orbitrap Fusion Lumos MS配備了先進(jìn)的真空技術(shù)，能夠為分析完整的蛋白提供優(yōu)化條件。結合多樣性碎片，Orbitrap Fusion Lumos MS的ETD HD可以提供改進(jìn)的檢測限和動(dòng)態(tài)范圍，從而在更快的捕獲速率下獲得更大的序列覆蓋率。此外，它還可用于重鏈和輕鏈的完整單克隆抗體的高精度質(zhì)量分析。

小分子分析

由于其高靈敏度和高分辨率，Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhì)譜儀可用于鑒定和定量小分子。由于可以觀(guān)察到精細的同位素結構，可以用于測定高精度的分子式。這種直接測量消除了模式匹配估計的模糊性。此外，更明亮的離子源使它能達到更低的定量水平。

Thermo Scientific公司的Orbitrap Fusion Lumos Tribrid三合一質(zhì)譜儀具有某些高級功能，包括新型API接口、先進(jìn)的四極桿技術(shù)、高場(chǎng)Orbitrap分析儀和雙壓線(xiàn)性離子阱。獨特的儀器架構可在任何碎片化階段執行多種解離技術(shù)，如HCD和CID，并在線(xiàn)性離子阱或Orbitrap質(zhì)量分析儀中分析離子。